培養(yǎng)箱內(nèi)細胞定時連續(xù)熒光成像的數(shù)據(jù)分析與可視化觀察,對于研究細胞的動態(tài)行為和生理過程至關重要。以下是相關介紹:
數(shù)據(jù)分析
細胞生長與增殖分析:可以基于明場或熒光圖像自動計算細胞融合度并生成生長曲線,還能自動計算熒光通道每孔的平均熒光強度,以此了解細胞的增殖情況。如 JuLI™ Stage 的標配軟件就能根據(jù)測得的細胞融合度自動生成曲線,量化細胞遷移率,更加準確地顯示細胞遷移率的變化。
熒光細胞計數(shù):使用細胞計數(shù)模塊,對熒光染色細胞進行計數(shù),可通過改變熒光強度及其他參數(shù)來優(yōu)化結果,從而確定細胞數(shù)量的變化。
熒光強度分析:通過分析熒光強度水平,量化 GFP、RFP 和 DAPI 通道中圖像的平均熒光強度,了解熒光標記的分子或結構的表達水平和變化趨勢。
細胞行為追蹤:結合時間序列熒光圖像,通過軟件量化細胞相互作用的關鍵參數(shù),如接觸頻率、接觸時長、距離變化等,還可分析細胞的運動軌跡,了解細胞的遷移速度、方向改變等行為。
共定位分析:同時采集明場和多個熒光通道圖像,通過軟件疊加分析細胞間的空間關系,計算兩種熒光信號的重疊程度,即共定位系數(shù),以確定不同分子或結構在細胞內(nèi)的共定位情況。
可視化觀察
延時攝影視頻制作:使用相關軟件,如 JuLI™ Stage 標配的 EDIT 軟件,可以創(chuàng)建各種類型的延時攝影視頻,包括單個視頻編輯、視頻拼接和視頻矩陣,將細胞的動態(tài)變化過程以視頻的形式直觀地展示出來,可還原到任何想要觀察的時間點,實現(xiàn)隨時、連續(xù)地觀察細胞形態(tài)變化、生長狀態(tài)和運動過程。
圖像編輯與處理:可以對單個圖像或所有圖像的亮度和對比度等設置進行編輯,優(yōu)化圖像質(zhì)量,以便更好地觀察細胞結構和熒光信號。
數(shù)據(jù)可視化呈現(xiàn):通過繪制圖表,如生長曲線、熒光強度曲線等,將數(shù)據(jù)分析的結果以直觀的圖表形式呈現(xiàn),便于直觀地比較和分析不同條件下細胞的變化趨勢。
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